Dinding sel yis terutamanya mengandungi glukan, serta beberapa mannoprotein, protein, lipid dan sejumlah kecil kitin. Glukan ragi terutamanya glukan tidak larut alkali. Glukan tidak larut alkali ialah polisakarida aktif. Kunci penyediaan adalah untuk membuang kekotoran seperti protein, mannan dan lipid. Pada masa ini, kaedah utama penyediaan glukan yis di dalam dan di luar negara termasuk kaedah asid-bes, kaedah enzimatik dan pengekstrakan oksidatif.
1.1 Kaedah asid-bes
Mannaners[1] pertama kali menggunakan kaedah asid-bes untuk mengekstrak glucan daripada yis, dan selepas penambahbaikan oleh Williams et al., proses yang stabil telah terbentuk. Proses rawatan alkali yang dikaji oleh CHUNG [2] : Ambil 80g dinding sel yis dan ampaikan dalam 1000mL 4% larutan NaOH, simpan pada suhu 95 darjah selama 1j, sentrifuge, gantungkan bahan tidak larut dalam larutan NaOH 2000mL 3%, simpan ia pada 75 darjah selama 3j, sentrifuge, gantungkan bahan tidak larut dalam air suling, gunakan asid hidroklorik untuk mengekalkan pH kepada 4.5, simpan pada 75 darjah selama 1j, sentrifuge, basuh, dehidrasi dan keringkan untuk mendapatkan glukan yis. Dalam proses rawatan asid, pemilihan asid mempunyai pengaruh yang besar terhadap hasil glukan. Asid terlalu lemah, dan glikogen larut asid dan beta-1,6-glucan tidak dikeluarkan sepenuhnya; Keasidan yang terlalu kuat akan membawa kepada degradasi glucan tidak larut alkali dan mengurangkan hasil, jadi asid asetik ialah pilihan terbaik untuk melaraskan pH=4.5.
1.2 Kaedah enzim
Freimund [3] menggunakan kaedah enzimatik untuk merawat dinding sel yis untuk menyediakan glukan yis: Ambil 1.3kg dinding sel yis dan tambah 8.8L air, laraskan pH=7.0, tahan pada 125 darjah selama 5j , basuh dua kali selepas sentrifugasi, tambah air kepada 10L bahan tidak larut, rawat dengan protease beralkali - Savinase selama 5j, sentrifuge, basuh dan keringkan, dan kemudian basuh dengan etanol atau aseton untuk mendapatkan sampel dextran dengan kandungan lebih daripada 85%. Tang Zhiyu [4] mengekstrak dinding sel yis melalui kaedah gabungan enzim-alkali, merawat yis autolisis dengan papain selama 18j, dikumpul dan dimendakan, dan dirawat dengan 2% NaOH selama 3j pada suhu tinggi. Kandungan polisakarida sampel adalah lebih daripada 87%, dan hasil adalah 10%. Zhao Guangyuan [5] merawat dinding sel yis dengan protease pada 57 darjah selama 24j, kemudian mengemparkan mendakan dengan 2% NaOH pada 60 darjah selama 3.5j, disentrifugasi, dibasuh dan dikeringkan untuk mendapatkan sampel yis glukan.
Rawatan enzimatik dinding sel yis boleh mengeluarkan sejumlah besar protein, sekali gus mengurangkan kepekatan dan penggunaan alkali seterusnya. Struktur molekul produk yis glucan adalah lebih lengkap, dan struktur molekul glucan berkait rapat dengan aktiviti biologinya. Oleh itu, kaedah enzimatik lebih sesuai untuk pengekstrakan dan penulenan glukan yis berskala besar.
[1] Adab, DJ, Masson, AJ, & Patterson, JC (1973a). Struktur a -(1-3)-D-glucan daripada dinding sel yis. Jurnal Biokimia, 135(1):19-30.
[2] CHUNG, Bong - Hyun. PARK,Jeong Hoon.et al. Komposisi yang terdiri daripada glucan oligomer larut daripada saccharomyces cerevisiae IS2 untuk pengaktifan imun atau pencegahan dan rawatan kanser dan kaedah penyediaan. PCT [P]．App l．WO2004.
[3] Freimund, S., Sauter, M., Kappeli, O., & Dulter, H. (2003). Proses pengasingan tidak merendahkan baharu untuk 1,3-bD-glukan ketulenan tinggi daripada yis pembuat roti Saccharomyces cerevisiae. Polimer Karbohidrat, 54, 159–171.
[4] Tang Zhiyu, Wang Huai, Xiong Shanbai. Pengekstrakan yis bir dengan kaedah autolisis-enzim-alkali - Kajian tentang proses 1,3-glukan [J]. Sains dan Teknologi Makanan Moden, 2006 (02)
[5] Zhao Guangyuan. Kajian tentang penyediaan glukan tidak larut alkali daripada sisa autolisis sisa yis bir [J]. Jurnal Universiti Pertanian Huazhong (Edisi Sains Asli), 1997 (2)
